檢測(cè)報(bào)告:鴿圓環(huán)病毒、腺病毒陽(yáng)性
呼鴿子疫病檢測(cè)報(bào)告
(一) 樣品來(lái)源及處理方法 1、樣品信息:呼市病鴿(死亡)樣品,分別命名為1#、2#、3#、4#、5#、6#。 2、樣品處理:無(wú)菌條件下,取每個(gè)樣品腦、肺、肝臟、脾臟和胰腺等組織,加生理鹽水充分研磨后,12000rpm離心10min,取上清用于核酸的提取。 (二) 試驗(yàn)方法及步驟 1、病毒DNA/RNA提取:按Anxgen基因組提取試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作,獲得樣品的DNA和RNA。 2、病毒RNA反轉(zhuǎn)錄:依據(jù)天根一步法反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作,得到樣品的cDNA。 3、利用本實(shí)驗(yàn)室建立的鴿I型副黏病毒、圓環(huán)病毒、皰疹病毒、腺病毒和輪狀病毒檢測(cè)方法,進(jìn)行PCR檢測(cè)。 (三) 試驗(yàn)結(jié)果 1、 剖檢情況如下
編號(hào)1-6#,分別對(duì)應(yīng)21.9.6死亡鴿5只,21.9.5死亡鴿1只。 剖檢可見病變基本一致,腦不同程度出血,脾臟、腸道出血嚴(yán)重;腎臟腫大,表面有出血。
2、 PCR鑒定 圖1 鴿I型副黏病毒(兩對(duì)引物)和鴿輪狀病毒PCR檢測(cè)結(jié)果 (I型副黏病毒兩對(duì)引物,目的條帶大小295bp和800bp) 1-6#全為鴿I副粘病毒陰性;全為鴿腺病毒陰性
圖2 鴿圓環(huán)病毒檢測(cè)PCR結(jié)果 (目的條帶大小325bp) 樣品1、3、5、6#為鴿圓環(huán)病毒陽(yáng)性 圖3 鴿皰疹病毒PCR檢測(cè)結(jié)果 樣品1-6均為鴿皰疹病毒陰性
圖4 鴿腺病毒PCR檢測(cè)結(jié)果 (兩對(duì)引物,目的條帶大小1000bp和700bp) 全為鴿腺病毒陽(yáng)性
3、 結(jié)果分析 6個(gè)樣品均為鴿I副粘病毒、皰疹病毒和輪狀病毒陰性,樣品1、樣品3、樣品5、樣品6為鴿圓環(huán)病毒陽(yáng)性,所有樣品全為腺病毒陽(yáng)性。
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